荧光原位杂交

1.向被检测者解释本操作的目的、方法等，消除顾虑。

2.选取血液、其他体液或细胞进行检测，如需要进行有创伤的操作则需要提前完善凝血功能测定等相关检查。

1.实验前细胞处理

包括收集细胞、固定、细胞悬液的制备和保存。

2.玻片准备

滴制备好的细胞样本到载玻片上，并用乙醇等溶剂处理玻片。

3.预变性和变性

将探针液滴到标本玻片上，小心盖上盖玻片并密封，将封好的玻片放在约75℃的热台上变性5分钟。

4.杂交

将玻片置于避光潮湿的盒子中，放入约37℃恒温环境中约12小时。

5.洗片

小心去掉盖玻片和封片胶，在约75℃的水浴箱中浸泡并晾干，加入4，6-脒基-2-苯基吲哚（DAPI），盖上盖玻片，避光放置约10分钟，用荧光显微镜观察。

1.基因染色体定位和基因图谱绘制

可快速确定一系列DNA序列之间的相互次序和距离，完成基因制图。标记同一DNA链与不同种属细胞的染色体杂交，可以找出不同种属之间的同源基因以及基因在染色体上的位置，从而了解种属之间的进化关系。

2.检测染色体数目与结构异常

羊水染色体异常荧光原位杂交技术能够快速、有效地检测染色体疾病以便早期确诊，结合羊水染色体核型分析是一种有效的染色体疾病的产前诊断办法。

3.血液肿瘤学应用

基因缺失检测可以发现一些关键基因的缺失，有助于疾病的诊断及预后判断；使用荧光原位杂交技术可对微小残留病灶进行检测，以及进行造血干细胞移植状态的监测。

4.实体肿瘤学应用

采用多种染色体探针，以不同的颜色标记，可用于肿瘤染色体数目改变的异质性研究，主要用于对肿瘤的早期诊断、疗效检测、个体化治疗和预后判断等方面。

1.检测的过程中，必须保持载玻片的湿润，以免由于检测试剂的非特异性结合导致高背景荧光。

2.从荧光素标记到制片结束，整个过程须避光完成，光照会对结果造成影响。

3.必须严格按照程序操作，如果在玻片的变性、杂交和信号点计数过程不遵守程序，可能出现错误的结果。