电泳迁移率变动分析
用放射性同位素标记待检测的片段(即探针DNA),然后与细胞提取物共温育,形成DNA-蛋白复合物,将该复合物加到非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。
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电泳迁移率变动分析,又称凝胶阻滞实验,英文名electrophoretic mobility shift Assay,简称EMSA。是体外利用电泳迁移率的变化来分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。
通常用32P标记DNA分子,而不标记蛋白质。电泳结束后,用放射自显影技术显现具放射性标记的DNA条带位置。如果细胞蛋白提取物中不存在与同放射性标记的DNA探针结合的蛋白质,那么所有放射性标记都将出现在凝胶的底部;反之,将会形成DNA-蛋白质复合物,由于受到凝胶阻滞的缘故,放射性标记的DNA条带就会出现在凝胶的不同部位。
用于研究特定的转录因子以及转录因子所结合的顺势作用元件。
用于研究与蛋白质相结合的DNA的序列的特异性。
评估突变对探针DNA与结合蛋白相互作用的影响。
用于研究DNA-foot printing。
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